摘要
目的:探讨复方五凤草液治疗结核性溃疡的临床疗效及对巨噬细胞极化的影响。方法:(1)临床实验:将南京市中西医结合医院145例结核性溃疡患者按随机数字表法分为观察组、对照I组和对照II组。三组均予以基础抗结核化学治疗的同时,观察组予以复方五凤草液,对照I组予以康复新液,对照II组予以异烟肼液局部外用治疗,疗程4周。分别观察三组患者创面愈合总有效率、中医证候积分、创面组织病理学形态及创面组织中iNOS、Arg-1的表达水平。(2)细胞实验:Raw264.7细胞用完全培养基DMEM(10%的胎牛血清,1%的双抗溶液)于37℃,5% CO2的细胞培养箱中培养。经PMA诱导后向巨噬细胞分化,分别用脂多糖(LPS)诱导成M1巨噬细胞、IL-4诱导成M2巨噬细胞,分别予康复新溶液、异烟肼液、复方五凤草液处理以上细胞模型36h,收集细胞上清液并离心,蛋白质印迹(Western blotting,WB)技术检测TNF-α、TGF-β、INOS和Arg-1的蛋白量的表达,流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测药物对CD86、CD206表达的影响。结果:临床实验:与对照I、II组比较,观察组的总有效率明显较高(P<0.05);与对照I、II组比较,观察组中医证候积分显著降低(P<0.05);与对照I、II组比较,观察组创面组织病理学形态改善更为明显;治疗28天后,与对照I、II组比较,观察组患者局部病灶组织样本中的iNOS表达量显著降低(p<0.05),Arg-1表达量显著升高(p<0.05,p<0.001)。细胞实验:Western Blot检测细胞中蛋白的相对表达量,结果表明显示与对照组相比,LPS+复方五凤草液组M1型巨噬细胞iNOS、TNF-α表达较低(P<0.05,P<0.01),IL-4+复方五凤草液组M2型巨噬细胞Arg-1、TGF-β表达较高(P<0.05,P<0.01);流式实验结果显示与对照组相比,LPS+复方五凤草液组对M1型标志分子CD86的表达量明显下调(P<0.01,P<0.001),IL-4+复方五凤草液组M2型标志分子CD206的表达量显著上调(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论:复方五凤草液能有效促进结核性溃疡愈合,其作用机制可能是通过抑制iNOS、TNF-α、CD86的表达并促进Arg-1、TGF-β、CD206的表达,从而调控M1/M2巨噬细胞极化平衡来完成。