雷公藤红素（celastrol，CEL）在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）治疗中展现出良好前景，但其直接靶点及具体机制尚未完全阐明。本研究旨在评价CEL对胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis，CIA）大鼠的疗效与安全性，明确其直接靶点，并探讨其对巨噬细胞功能的影响及分子机制。

      1、体内疗效评价： 对CIA大鼠给予CEL灌胃治疗（2mg/kg，每3天1次），评估药效学指标及安全性。

      2、靶点筛选与验证：利用人类蛋白质组芯片结合RA患者滑膜组织转录组数据（GSE89408）筛选CEL治疗RA的直接靶点，并通过分子模拟技术及细胞热位移实验（CETSA）进行验证。

      3、 体外机制研究：采用LPS诱导的巨噬细胞炎症模型，检测细胞活力、炎症相关因子表达及JAK/STAT通路蛋白表达。

      1、体内疗效：CEL可显著降低CIA大鼠踝关节厚度、关节炎指数（AI）评分及足跖温度（均 p < 0.001），抑制血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）及白细胞介素-1β（IL-1β）水平（p < 0.001），降低胸腺指数及脾脏指数（p < 0.001）；踝关节Micro-CT及组织病理染色证实CEL可抑制骨侵蚀、改善关节病理损伤，且对主要脏器无明显毒性作用。

      2、靶点筛选：人类蛋白质芯片筛选出395个CEL结合蛋白，与转录组数据交集获得106个共同靶点，显著富集于JAK-STAT通路，其中CEL与STAT3的结合信噪比最高（3.95），结合能为−6.4 kcal/mol，分子模拟及CETSA进一步证实二者结合稳定。

      3、体外机制：CEL（0.25–0.75 μM））可浓度依赖性抑制巨噬细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的mRNA表达（p < 0.001），降低M1型巨噬细胞CD86阳性细胞比例（p < 0.001）；Western Blot结果显示CEL可显著抑制STAT3磷酸化（p < 0.001）及JAK1表达，并减少减少iNOS产生（p < 0.001）。

      本研究从“药效—靶点—信号通路”三个层面系统揭示了CEL通过直接靶向并抑制STAT3磷酸化活化，进而缓解CIA大鼠关节炎的分子机制，为靶向STAT3的RA治疗策略提供了实验依据。