摘要
传统中药在口腔骨重建中的应用引起了广泛的兴趣,本研究旨在探究中药康复新液对拔牙创愈合的影响及其通过干细胞介导的促血管生成机制。
建立小鼠拔牙模型,局部应用康复新液,通过Micro-CT、组织染色(H&E、天狼星红、Goldner三色)及扫描电镜评估骨愈合情况。体外培养小鼠骨髓间充质干细胞(mBMSCs)、人牙周膜干细胞(hPDLSCs)和人牙髓干细胞(hDPSCs),利用KFX干预后,通过RNA测序、qRT-PCR、Western blot分析差异基因表达。收集干细胞条件培养基(CM),处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs),通过划痕实验、Transwell实验及成管实验评估其迁移与成血管能力。采用siRNA敲低CCL2及外源性重组CCL2进行功能挽救验证。
康复新液显著促进小鼠拔牙创骨愈合,增加骨量、胶原沉积及矿化。RNA测序显示康复新液上调mBMSCs中趋化因子相关基因,尤以CCL2表达升高最显著(约3.8倍)。康复新液处理的hPDLSCs和hDPSCs条件培养基显著促进HUVECs的迁移与成管。敲低CCL2可消除该促血管生成作用,而外源性CCL2可逆转此效应。体内实验证实康复新液组牙槽骨血管密度及H型血管数量增加。
康复新液通过上调干细胞中CCL2的表达,促进血管内皮细胞迁移与血管生成,从而加速拔牙创骨组织愈合与矿化。
