摘要
探讨长链非编码 RNA GAPLINC 对RA-FLS细胞增殖相关基因Cyclin D1/PCNA的影响。
收集2022年1月至2024年12月于海南医科大学附属海南医院行滑膜清理术或膝关节置换术的RA患者及创伤性关节炎患者废弃滑膜组织,分离培养并鉴定FLS细胞。通过qPCR法检测RA组和创伤组滑膜细胞内LncRNA GAPLINC 表达水平。利用 siRNA干扰技术靶向敲低GAPLINC表达,通过qPCR法与WB法检测细胞周期调控蛋白cyclin D1、PCNA及周期抑制蛋白P21的表达水平,通过流式细胞术检测各组细胞的细胞周期分布情况。
本研究通过qRCR验证发现,RA组FLS的LncRNA GAPLINC表达水平明显高于创伤组FLS(P<0.05);特异性siRNA 对 GAPLINC 的干扰效率为(85.96±1.76)%(P <0.05)。敲低GAPLINC后,与增殖表型正相关的基因Cyclin D1和PCNA的mRNA和蛋白水平均下降(P<0.05),而与增殖表型负相关的基因p21表达上调(P<0.05)。利用流式细胞术检测各组细胞周期分布,结果显示 GAPLINC 干扰组 PI值,即 S+G2/M 期细胞所占的百分比为(14.92±5.34)%,明显低于空白对照组(29.68±8.48)%、溶 剂对照组(28.97±6.82)%、阴性对照组(31.13±5.13)%(P<0.05)。
RA组中LncRNA GAPLINC表达显著升高,敲低GAPLINC后,增殖正相关基因Cyclin D1和PCNA表达降低,而负相关基因p21表达上调,细胞S+G2/M期比例显著下降,提示GAPLINC可能通过调控细胞增殖相关基因表达促进RA-FLS增殖。
