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基于DIA蛋白质组学的强直性脊柱炎伴葡萄膜炎血 浆蛋白特征的初步筛选与验证研究
作者: 王蕊
单位: 中国医科大学附属第一医院

摘要

强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis,AS)是一种慢性炎症性风湿病,常伴有关节外表现,其中急性葡萄膜炎(Acute Uveitis,AU)为常见并发症,约30–40%的 AS 患者受累,严重者可导致继发性青光眼、白内障及黄斑水肿等视力损害。AU的早期诊断有助于预防视力损伤并改善生活质量,但目前缺乏特异性生物标志物以实现早期识别与病情监测。本研究旨在应用数据非依赖采集(Data-Independent Acquisition,DIA)蛋白组学技术,筛选 AS伴AU患者血浆中差异表达蛋白并评估其作为生物标志物的潜力。

收集2024年7月–2025年11 月在风湿免疫科及眼科就诊患者的血浆样本共21例,分 为A组(AS伴AU,n=8)、B组(单纯AS,n=8)和 C组(单纯AU,n=5)。 采用DIA蛋白组学进行蛋白鉴定与定量,差异蛋白筛选标准为FC>1.5或<1/1.5 且P<0.05。对差异蛋白开展生物信息学分析(GO、KEGG及PPI网络)以挖掘其生物学功能与通路。验证队列纳入独立样本81例(AS伴AU组30例、单纯 AS 组30例,单纯AU组21例),采用ELISA法检测候选蛋白PRKCB、LYN、 RHOA、AMBP的血浆浓度,对两组间差异显著的蛋白,采用ROC曲线分析其 诊断效能。

蛋白组学共鉴定到2354个蛋白。A组与B组比较筛选出179个差异蛋白 (89 上调,90下调),A组与C组比较鉴定142个差异蛋白(92上调,50下 调)。富集分析显示差异蛋白显著富集于补体与凝血级联、NF-κB信号通路、细 胞粘附与黏附连接以及雌激素信号通路等,结合 PPI 网络分析筛选出 LYN、 PRKCB、AMBP、RHOA为候选蛋白。ELISA验证显示:AS伴AU组血浆PRKCB 和LYN浓度均显著高于单纯AS组和单纯AU组,RHOA在AS伴AU组与单纯 AS 组间差异无统计学意义,AMBP在三组间差异均无统计学意义。ROC分析中 PRKCB与LYN的AUC分别为0.986和0.984,提示其具有潜在的诊断价值。

本研究通过DIA蛋白组学技术展示了AS伴AU患者血浆中的差异蛋白特征,初步筛选和验证了PRKCB和 LYN作为潜在生物标志物的价值,上述蛋白可能通过调控NF- kB等炎症通路参与AS继发AU的发病过程,其高表达可能与AS患者并发AU的炎症状态相关,但其具体机制尚需进一步功能验证。

关键词: 强直性脊柱炎;急性葡萄膜炎;蛋白组学;生物标志物;PRKCB;LYN
来源:中华医学会第二十八次风湿病学学术会议