探讨M2型丙酮酸激酶（PKM2）异构激活剂TEPP-46与Mitapivat对狼疮性肾炎（LN）小鼠的肾脏保护作用及分子机制，明确靶向调控PKM2是否通过纠正免疫代谢异常、调节巨噬细胞极化平衡，进而减轻LN病理损伤，为临床治疗提供新策略。

本研究采用网络药理学预测结合体内外实验验证的策略。首先，利用公共数据库获取Mitapivat药物靶点及LN疾病相关靶点，构建药物-疾病靶点相互作用网络，并进行GO功能富集及KEGG通路分析，预测Mitapivat治疗LN的潜在靶点及信号通路。体内实验以自发性LN的MRL/lpr小鼠为模型，设MRL/mpj正常对照组、MRL/lpr模型组、MRL/lpr+TEPP-46组及MRL/lpr+Mitapivat组，自8周龄起连续腹腔给药8周。检测指标包括：肾功能（血肌酐、尿蛋白）、肾组织病理、免疫复合物沉积（IgG、IgM、C3）、免疫器官大小、肾脏巨噬细胞及T细胞浸润、炎症因子表达等。体外实验采用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞炎症模型，给予不同浓度TEPP-46和Mitapivat干预，Western blot检测巨噬细胞极化标志物（iNOS）、炎症通路蛋白（p-NF-κB p65、TNF-α）、PKM2磷酸化水平及HIF-1α/STAT3通路相关蛋白表达。

网络药理学分析结果显示，Mitapivat与LN的共同靶点富集于PI3K-AKT、TNF等炎症免疫相关通路，关键靶点涉及PI3K-AKT信号通路核心分子（如AKT、PIK3R1）及HIF-1α、mTOR等，提示Mitapivat可能通过调控多条炎症信号通路及糖酵解代谢发挥治疗作用。体内实验结果显示，与MRL/lpr模型组相比，TEPP-46和Mitapivat干预组小鼠血肌酐及尿蛋白水平显著降低，肾小球结构紊乱、系膜增生、炎症细胞浸润及胶原沉积等病理损伤明显改善，肾小球内IgG、IgM及补体C3沉积减少。两种药物均可显著抑制LN小鼠脾脏及淋巴结异常增大，降低肾脏组织中巨噬细胞及T细胞浸润，减少趋化因子MCP-1表达。体外实验结果表明，TEPP-46和Mitapivat可浓度依赖性抑制LPS诱导的RAW264.7细胞活化，显著下调促炎标志物iNOS、p-NF-κB p65及TNF-α蛋白表达；同时抑制PKM2在Tyr105位点的磷酸化激活，且不改变总PKM2蛋白水平；进一步机制研究发现，两种药物可显著下调HIF-1α蛋白表达及STAT3通路磷酸化水平，与网络药理学预测的PI3K-AKT通路调控方向一致。

网络药理学预测联合体内外实验验证表明，PKM2异构激活剂TEPP-46与Mitapivat可通过抑制PKM2磷酸化及HIF-1α/STAT3信号通路激活，调控巨噬细胞由M1向M2表型极化，减轻肾脏局部炎症反应及病理损伤，改善LN小鼠肾功能。本研究从预测到验证证实了靶向PKM2介导的免疫代谢重编程是LN的有效治疗策略，为PKM2异构激活剂在LN临床治疗中的应用提供了实验依据。