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IFN-γ增强间充质干细胞免疫调节的生物学特性
作者: 张泽派
单位: 河北医科大学

摘要

自身免疫病以免疫稳态失衡为核心病理特征,现有疗法常难以实现长期缓解。间充质干细胞(MSCs)因其免疫调节与组织修复功能成为细胞治疗的热点,但临床疗效受限于其异质性与体内免疫抑制活性不足,在临床应用的有效转化中仍面临诸多挑战。IFN-γ 作为关键炎症因子,具有潜在调控MSCs 免疫功能的特性。本研究通过体外给予IFN-γ刺激,评估MSCs在免疫调节活性、成脂成骨分化能力及迁移趋化等关键生物学特性的变化。通过明确IFN-γ对MSCs功能的优化效应,旨在建立一种稳定、高效的MSCs体外预处理策略,以获得功能增强的MSCs制剂,为后续面向自身免疫病的细胞治疗研究提供质量更可控、活性更稳定的细胞来源。

采用组织块贴壁法进行人脐带间充质干细胞原代分离培养,数次传代后使用100ng/mL IFN-γ刺激MSCs 24小时,使用转录组测序技术进行刺激前后MSCs差异基因表达水平的定量分析,qRT-PCR法验证MSCs免疫抑炎分子的表达,流式细胞术验证MSCs表面标志物的表达、并用通过成脂、成骨染色法检测MSCs分化能力。

基于转录组测序分析,IFN-γ刺激组MSCs和对照组MSCs共有2304个差异基因。其中表达增高的1175个,表达降低的1129个。经qRT-PCR法验证发现刺激组MSCs免疫抑炎因子IDO、PD-L1、PD-L2、INOS和TGF-β基因表达显著升高。流式细胞术发现刺激组MSCs与MSCs免疫抑制功能相关的CD73、CD90和与MSCs迁移趋化相关的CD44平均荧光强度显著升高。显微镜下观察刺激组MSCs脂滴体积增大、数量明显增多,钙结节数量增多。

本研究结果表明,IFN-γ体外刺激可有效增强MSCs的多项生物学特性。经IFN-γ处理后,MSCs的免疫调节、迁移趋化及成脂与成骨分化潜能明显增强。基于此,经IFN-γ预处理的MSCs可作为功能增强的细胞制剂,为自身免疫病的细胞治疗研究提供更具应用潜力的细胞来源。

关键词: 干扰素gamma 间充质干细胞,免疫调节
来源:中华医学会第二十八次风湿病学学术会议