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益肺通痹汤缓解博来霉素诱导的小鼠肺纤维化
作者: 杜奎
单位: 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院

摘要

本研究旨在探讨益肺通痹汤(YFTBD)对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的干预作用,并结合化学成分分析与肠道菌群测序,系统评估其改善肺纤维化及相关炎症、纤维化反应的潜在机制,为该方剂在肺纤维化防治中的应用提供实验依据。

首先制备益肺通痹汤水煎液,经纱布过滤、离心、浓缩后配制成1 g/mL药液,4℃保存备用。采用HPLC-MS对方剂进行成分分析:取药液经石油醚脱脂处理后,以20%乙腈复溶定容,使用YMC-Pack ODS-AQ色谱柱,以乙腈和含1%四氢呋喃、0.05%磷酸的水溶液为流动相,在260 nm波长下进行梯度洗脱检测。动物实验选用58只雄性C57BL/6J小鼠,建立博来霉素诱导的肺纤维化模型,并按不同处理方案进行分组给药。实验过程中观察小鼠一般状态,评估肺组织病理学改变,并检测与炎症、纤维化相关的指标。同时采集粪便样本,进行16S rDNA高通量测序,开展α多样性、β多样性、群落结构及LEfSe分析,以评价益肺通痹方对肠道菌群的调节作用。统计学分析采用GraphPad Prism 9.0,计量资料以均数±标准差表示,两组比较采用t检验,多组比较采用单因素方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。

HPLC-MS结果表明,益肺通痹汤中含有多种可检测化学成分,为其药效物质基础研究提供了依据。动物实验显示,模型小鼠在博来霉素作用后出现明显肺组织损伤及纤维化改变,而益肺通痹方干预后,小鼠肺组织病理损伤减轻,炎症反应和胶原沉积程度改善,提示其具有一定的抗肺纤维化作用。此外,肠道菌群测序结果显示,肺纤维化模型小鼠肠道微生态结构发生紊乱,而益肺通痹方能够在一定程度上恢复菌群多样性,调节优势菌群丰度,改善菌群失衡状态。LEfSe分析进一步提示,给药后部分与炎症和代谢相关的关键菌群发生显著变化,表明该方可能通过“肺-肠轴”途径发挥保护作用。

益肺通痹汤对博来霉素诱导的肺纤维化小鼠具有明显改善作用,可减轻肺组织炎症与纤维化损伤,其机制可能与调控肠道菌群失衡、改善机体微生态环境有关。该研究从化学成分、药效评价和菌群调控等多个层面证实了益肺通痹方治疗肺纤维化的潜在价值,为进一步阐明其作用机制及临床转化应用提供了实验基础。

关键词: 益肺通痹汤;肺纤维化;胶原蛋白;细胞衰老;肠道菌群
来源:中华医学会第二十八次风湿病学学术会议