系统性硬化症相关间质性肺病（SSc-ILD）以进行性肺纤维化为主要特征，是SSc最严重的并发症之一，缺乏有效的靶向治疗策略。本研究旨在深入探究SSc-ILD的致病机制，挖掘关键治疗靶点，为其临床转化提供理论依据。

整合本中心1例肺移植患者及GEO数据库中同类型样本的单细胞测序数据，共纳入11例SSc-ILD患者与13例健康对照，分析成纤维细胞异质性及补体通路激活情况。构建博来霉素（BLM）诱导的SSc小鼠模型（BLM-SSc），进行单细胞测序，绘制肺细胞图谱，并与人源样本比对，鉴定关键分子补体因子D（CFD）。通过蛋白印迹（WB）、免疫荧光及酶联免疫吸附试验（ELISA）进行验证。采用CFD抑制剂Danicopan（0.5、1.0、2.0 mg/kg）对BLM-SSc小鼠进行口服干预，通过微计算机断层扫描（MicroCT）、组织病理染色及WB评估抗纤维化效果。

体外实验中，使用TGF-β1刺激人胚肺成纤维细胞（HFL-1），通过实时聚合酶链反应（RT-PCR）和WB检测补体旁路蛋白表达，并利用免疫荧光、核质分离及线粒体提取等方法进行亚细胞定位。采用小干扰RNA（siRNA）干扰CFD表达，结合全转录组测序（Bulk RNA-seq）、透射电镜、JC-1及MitoSOX染色，探讨其对线粒体自噬及功能的影响。利用单细胞测序数据，通过“Cellchat”包分析成纤维细胞与巨噬细胞的互作，并结合WB、细胞划痕、RNA-seq及流式细胞术，探讨C3a对两种细胞功能的影响。

单细胞测序显示，SSc-ILD患者肺组织中成纤维细胞比例显著升高，并鉴定出一群高表达细胞外基质（ECM）基因的促纤维化成纤维细胞亚群（Fib_POSTN），其演变与补体通路激活相关。BLM-SSc小鼠模型肺细胞图谱与人源样本相似，成纤维细胞中CFD表达量显著升高，WB及免疫荧光证实其主要由致病性成纤维细胞亚群产生。ELISA显示，造模第14天起，小鼠肺泡灌洗液中CFD、C3、C3a水平显著升高。

Danicopan干预可减轻小鼠体重下降，改善MicroCT显示的肺部纤维化改变，降低病理评分及纤维化相关蛋白（FN1、COL1A1、α-SMA）表达，其中2.0 mg/kg剂量效果最显著。

体外实验中，TGF-β1刺激HFL-1后，补体旁路蛋白（C3、C3a、C3aR1、CFD、CFB）表达升高。亚细胞定位显示C3aR1定位于线粒体表面。siRNA-CFD干预可降低细胞纤维化水平，Bulk RNA-seq提示线粒体自噬途径激活。功能实验证实，TGF-β1刺激可导致线粒体损伤，而siRNA-CFD通过上调线粒体自噬，减少活性氧生成，恢复线粒体膜电位，保护细胞功能；使用3-甲基腺嘌呤（3-MA）抑制自噬后，保护作用消失。

细胞互作分析提示成纤维细胞与巨噬细胞间存在紧密关联，成纤维细胞来源的C3a可作用于巨噬细胞表面C3aR1。体外实验证实，C3a可激活PI3K/AKT通路，促进成纤维细胞活化与迁移，并可显著诱导巨噬细胞向M2表型极化，形成促纤维化正反馈环路。

SSc-ILD与BLM-SSc模型肺组织细胞图谱相似，补体激活及CFD分子高表达在纤维化中起关键作用。机制上，CFD通过抑制线粒体自噬驱动成纤维细胞活化；而胞外C3a则介导成纤维细胞-巨噬细胞间通讯，形成促纤维化正反馈。靶向CFD的小分子抑制剂在体内可有效减轻纤维化，提示CFD是SSc-ILD的潜在治疗靶点，为补体抑制剂的临床转化提供了实验依据。