唾液腺上皮细胞被认为是干燥综合征（SS）发病的关键启动因素，既是自身免疫应答的主要靶点，也是局部慢性炎症反应的起始结构。前期研究发现，黑色素瘤分化相关基因5（MDA5）在SS患者唇腺组织中表达上调。本研究旨在探讨MDA5介导的唾液腺上皮细胞死亡在SS发生发展中的作用及其分子机制。

首先，利用公共数据库（GEO）中的单细胞转录组测序数据GSE272409，分析MDA5在原发性干燥综合征（pSS）患者与健康对照者唾液腺上皮细胞中的表达差异。进一步，收集pSS患者唇腺组织标本，采用免疫组织化学染色验证MDA5的蛋白表达水平，并检测细胞死亡相关分子，包括坏死性凋亡标志物p-MLKL、p-RIPK1，焦亡标志物GSDMD，以及凋亡标志物Caspase-3的表达情况。在体外实验中，使用干扰素-γ（IFN-γ）刺激人唾液腺上皮细胞系（SGEC），构建细胞损伤模型，通过Western Blot和实时定量PCR检测MDA5及上述死亡相关分子的表达变化。最后，采用shRNA敲低MDA5表达，观察其对IFN-γ诱导的细胞死亡相关通路的影响。

单细胞分析结果显示，pSS患者唾液腺上皮细胞中MDA5表达水平显著高于健康对照。组织水平验证亦提示，pSS唇腺组织中MDA5蛋白表达明显升高，同时多种细胞死亡相关分子（p-MLKL、p-RIPK1、GSDMD和Caspase-3）表达亦显著上调，提示坏死性凋亡、焦亡和凋亡等多种死亡方式在患者腺体中同时存在。体外实验中，IFN-γ可诱导SGEC中MDA5及p-MLKL、p-RIPK1、GSDMD和Caspase-3表达上调。而敲低MDA5后可显著减弱上述死亡相关分子的激活。

本研究表明，MDA5在原发性干燥综合征患者唾液腺上皮细胞中表达升高，并通过调控坏死性凋亡、焦亡及凋亡等多种细胞死亡通路参与腺体上皮的损伤过程。该发现为理解MDA5在SS发病机制中的作用提供了新的实验依据，也为靶向干预唾液腺上皮细胞死亡以缓解SS疾病进展提供了潜在的治疗思路。