基于前期临床多组学发现（系统性硬化症（SSc）患者肠道黏液乳杆菌（L. mucosae）富集且与血浆丝氨酸水平负相关），本研究通过体内外实验，深入探究“L. mucosae-丝氨酸代谢-巨噬细胞（Mφ）极化”轴在SSc纤维化中的作用及机制。

1. 动物实验： 采用博来霉素（BLM）诱导的SSc小鼠模型，灌胃给予L. mucosae。通过16S rRNA测序、非靶向代谢组学、流式细胞术、qPCR、Western Blot及多重免疫荧光技术，评估其对皮肤纤维化、肠道菌群、血浆代谢物、Mφ极化、巨噬细胞-肌成纤维细胞转化（MMT）及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。2. 细胞实验： 利用IL-4/IL-13诱导RAW264.7细胞建立M2型Mφ极化模型，给予不同浓度丝氨酸干预，检测细胞活力、M2标志基因（CD206, Arg-1）表达及PI3K/Akt/mTOR通路变化。

1. 动物实验：L. mucosae干预显著加剧BLM诱导的小鼠皮肤纤维化，与模型组相比，真皮层厚度进一步增加（P<0.05），胶原面积占比显著升高（P<0.05），Acta2、Col1a1、Timp1及Tgfb的表达水平均显著升高（P<0.05）。L. mucosae重塑了肠道菌群结构，并显著降低血浆丝氨酸水平（P<0.05）。FCM结果显示，L. mucosae组皮肤M2型Mφ（CD206⁺CD11b⁺）比例（76.63±14.07%）较模型组（32.46±10.16%）显著升高（P<0.01），而脾脏M2比例则较模型组降低（P<0.01），呈现“皮肤富集”模式。多重免疫荧光显示，L. mucosae组皮肤中CD68⁺CD206⁺α-SMA⁺三阳性细胞数量较模型组增加（P<0.01），证实MMT增强。Western Blot显示，L. mucosae组p-PI3K、p-Akt和p-mTOR的蛋白相对表达水平均较Model组显著降低（均P<0.01）。2. 细胞实验：1 mM丝氨酸显著逆转IL-4/IL-13诱导的M2极化，使CD206、Arg-1与Fizz-1表达均极显著低于模型组（P<0.05），同时p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达显著抑制（均P<0.05），呈浓度依赖性。

本研究揭示了“L. mucosae-丝氨酸缺失-M2 Mφ极化”是驱动SSc纤维化进程的关键致病轴。L. mucosae可能通过消耗血浆丝氨酸，重塑Mφ的代谢-信号耦合方式（M2极化增强但PI3K/Akt/mTOR通路磷酸化下调），促进MMT，从而加剧纤维化。丝氨酸对M2极化的调控与其抑制PI3K/Akt/mTOR通路有关。本研究为SSc纤维化机制提供了“菌群-代谢-免疫”多维调控的新视角。