抗黑色素瘤分化相关基因5抗体阳性皮肌炎（anti-melanoma differentiation-associated gene 5 antibody-positive dermatomyositis, MDA5-DM）是特发性炎性肌病（idiopathic inflammatory myopathies, IIM）中最具特征的疾病亚型。患者常表现为快速进展肺间质疾病（rapidly progressive interstitial lung disease, RP-ILD），且治疗反应差，死亡率较高。尽管已知多种免疫细胞失调参与发病，包括外周血表现为淋巴细胞数目减少，肺部存在过渡激活的巨噬细胞分泌促炎及促纤维化因子，然而患者肺部的适应性免疫细胞特征，及其与抗MDA5抗体的关联机制尚不明确。

本研究纳入11例肺部受累的活动性MDA5-DM患者支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）样本，其中包括4例合并RP-ILD表现的患者，以及7例普通ILD进展的患者。同时纳入5例外周血（peripheral blood, PB）样本，其中4例与BALF匹配，进行5‘转录组及免疫组库单细胞RNA测序（single-cell RNA sequencing, scRNA-seq）。另外，纳入抗MDA5抗体阴性IIM患者及健康人群的BALF及PB样本，作为对照组，用以比较分析。分别构建MDA5-DM患者的BALF及PB单细胞图谱，并分析细胞比例改变、临床相关性、转录组改变、细胞发育、免疫组库分析及细胞互作，找到与疾病关联的细胞亚型改变及其致病的生物学过程。

研究结果显示，MDA5-DM患者肺部出现显著的免疫细胞改变，突出表现为肺部存在浆细胞异常增多，进一步分析提示，肺部微环境可能存在B细胞免疫耐受破坏，导致B细胞发生滤泡外活化并直接分化为浆细胞，同时该过程受到肺部大量浸润的T细胞及髓系细胞参与。另外，患者肺部存在组织驻留记忆CD4+ T细胞的异常增多，可进一步分化为细胞毒性CD4+ T细胞发挥杀伤功能。外周血单核细胞可被肺巨噬细胞招募入肺，并分化为炎性巨噬细胞，随后，在氧化应激环境诱导下，可进一步分化为促纤维化功能的巨噬细胞。同时，肺巨噬细胞也可自我趋化，进一步加快炎症及纤维化进程。

MDA5-DM患者以肺部免疫细胞失调为核心特征，在肺部高IFN信号诱导的炎性及氧化应激环境下，表现为B细胞异常分化与T细胞辅助激活，以及巨噬细胞的分化及功能转换。