本研究旨在系统探究NETs是否在RA患者BMSCs的衰老中起核心作用，通过证实RA患者BMSCs是否存在衰老表型增加的现象，明确RA患者关节组织及外周血中NETs的生成水平及其对健康BMSCs衰老的诱导作用，并进一步解析NETs中驱动BMSCs衰老的核心效应分子及其生物学功能，从而为揭示RA发病机制提供新视角，并为开发靶向干预策略提供理论依据。

1. BMSCs分离鉴定与衰老检测：胶原酶消化分离人骨髓BMSCs，流式细胞术鉴定其表面标记物及三系分化能力；Ki-67、Annexin V-PE/7-AAD、SA-β-gal染色分别检测增殖、凋亡、衰老；Western blot和RT-qPCR检测p53/p21/p16通路及SASP核心因子表达。

2. NETs检测与验证：免疫荧光检测RA患者滑膜组织MPO、CD11b及NETs形成；SYTOX Green标记结合流式细胞术定量外周血中性粒细胞NETs；PMA诱导NETs纯化后与健康BMSCs共培养，复检测衰老指标。

3. 多组学与功能验证：对相关BMSCs行转录组测序筛选差异基因并比对分析；对HC与RA NETs行蛋白质谱筛选差异蛋白；CCK8筛选ANXA5安全浓度，共培养后验证其对BMSCs衰老的诱导作用。

1. RA患者BMSCs衰老表型增加：与HC组相比，RA组BMSCs Ki67阳性率降低，凋亡/坏死比例升高，SA-β-gal阳性率增加且形态呈衰老改变；p53、p21、p16及TNF-α、IL-6、IL-1的mRNA和蛋白（部分）表达上调，具明显SASP特征。

2. RA患者NETs生成增多且诱导BMSCs衰老：RA滑膜组织MPO⁺、CD11b⁺细胞增多且共定位增强，外周血NETs水平升高；NETs刺激后，健康BMSCs出现类似RA组的衰老表型。

3. ANXA5是关键效应分子：转录组筛选出85个共同差异基因，交叉比对获得11个核心基因；RA NETs中ANXA5过表达，2.5μg/mL ANXA5可诱导BMSCs衰老，效应与NETs刺激相当。

        本研究发现RA患者BMSCs呈现显著衰老表型，其机制与RA微环境中NETs生成增多密切相关。RA来源的NETs中ANXA5显著过表达，并通过激活p53/p21/p16信号通路诱导BMSCs衰老，同时促使BMSCs获得SASP特征，形成促炎-衰老的正反馈循环。本研究首次揭示ANXA5是NETs驱动BMSCs衰老的核心效应分子，将NETs从传统的促炎效应分子拓展至干细胞衰老诱导因素的新范畴，为深入理解RA全身性病理改变提供了新视角，也为靶向NETs-ANXA5轴干预RA骨破坏和慢性炎症提供了理论依据。