类风湿关节炎（RA）是一种以关节滑膜炎为特征的慢性炎症性自身免疫病。RA成纤维样滑膜细胞（FLS）和巨噬细胞间的相互作用在推动疾病发展中发挥重要作用。TNFα抑制剂（TNFi）是RA的一线生物治疗药物，但仍存在疗效瓶颈。神经轴突导向分子Slit3是一种高度保守的分泌型糖蛋白，是炎症反应的关键调节因子。本研究拟Slit3在TNFi应答不佳RA患者中的作用，旨在为这部分患者寻找新的生物标志物和潜在治疗靶点。

首先，采集RA患者滑膜及血清Slit3表达，分析其表达水平与RA病情指标及治疗效果的相关性。其次，通过siRNA下调体外培养的RA-FLS中Slit3表达后，收集来源于不同组别的RA-FLS的条件培养基用于THP-1单核细胞系诱导的M0巨噬细胞（THP-1-M0）的培养，观察上述不同组别条件培养基对THP-1-M0增殖、迁移及分化功能的影响。最后，通过ELISA配受体结合实验等探讨Slit3调控巨噬细胞功能的潜在机制。

在RA滑膜病理队列中发现，随访6个月后，TNFi应答不佳的RA基线滑膜组织、FLS及血清中Slit3表达水平明显高于对照组。体外实验中通过流式细胞分析发现，siSlit3-CM可促进M1型巨噬细胞表面标记分子CD86的表达，抑制M2型巨噬细胞表面标记分子CD163的表达。qPCR检测结果发现，siSlit3-CM可促进M1型巨噬细胞标志分子CD86和iNOS的mRNA表达水平，抑制M2型巨噬细胞标志分子CD163和IL-10的mRNA表达水平。ELISA配受体结合实验发现，Slit3直接与THP-1-M0细胞表面的Robo1结合。

RA-FLS可通过Slit3/Robo1通路促进巨噬细胞活化及向M2型巨噬细胞极化，从而导致TNFi疗效受限，为TNFi应答不佳RA治疗提供潜在治疗靶点。