目的：四氯双酚A（TCBPA）是一种广泛存在的环境内分泌干扰物，其对孕期、哺乳期女性及婴幼儿等敏感人群发育，尤其是骨骼发育的潜在影响尚不明确。本研究旨在利用斑马鱼模型，探究TCBPA对颅颌面骨骼发育的干扰作用及其分子机制。
方法：在斑马鱼颅颌面发育的敏感窗口期（11-96小时受精后，hpf）进行TCBPA（0.5, 0.6, 0.7 mg/L）暴露实验。采用转基因软骨荧光斑马鱼系Tg(col2a1a:Dendra2-NTR)观察软骨形态变化；利用实时荧光定量PCR检测软骨发育相关基因（col2a1a, sox9a, sox9b, runx2b）及凋亡相关基因（caspase3, p53, bax, bcl-2）的表达；通过TUNEL染色和PCNA抗体染色分析软骨细胞凋亡与增殖；采用全胚原位杂交和qPCR检测视黄酸（RA）信号通路相关基因（rxrba, cyp26b1）的表达；并使用RXRs激动剂贝沙罗汀进行挽救实验。

结果：TCBPA暴露导致斑马鱼胚胎提前孵化，并引起鱼鳔发育延迟、心包水肿、头部畸形及体轴弯曲等发育缺陷。TCBPA显著诱发了斑马鱼颅颌面软骨畸形，表现为梅克尔软骨、角舌骨长度变短、夹角增宽以及角鳃软骨发育不全，并延迟硬骨矿化。分子机制上，TCBPA下调了软骨发育关键基因（col2a1a, sox9a, sox9b, runx2b）的转录水平，并诱导了软骨细胞异常凋亡。进一步研究发现，TCBPA通过拮抗RA信号通路受体RXRβ的活性，抑制了下游基因的表达。贝沙罗汀的挽救实验有效逆转了TCBPA引起的表型畸形、软骨发育异常及基因表达下调。

结论：TCBPA通过拮抗RXRβ抑制RA信号通路，进而干扰软骨发育相关基因表达并诱导软骨细胞异常凋亡，最终导致斑马鱼颅颌面软骨发育畸形。本研究为评估TCBPA对敏感人群的发育毒性风险提供了科学依据。