本研究旨在探讨信号素蛋白4D(Semaphorin 4D,SEMA4D)在类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)中对中性粒细胞胞外陷阱(Neutrophil Extracellular Traps,NETs)形成的调控机制。

收集RA患者外周血及关节滑液，并以健康体检者(HC)及骨关节炎(OA)患者作为对照组。分离外周血清、外周血中性粒细胞及滑液，采用ELISA法检测血清、滑液中游离型SEMA4D、NETs标志物（游离核小体、弹性蛋白酶NE）水平；利用流式细胞仪检测中性粒细胞表面膜结合型SEMA4D的表达水平。分析RA患者血清游离型SEMA4D水平与临床指标的相关性。体外实验采用RA自身抗原瓜氨酸化纤维蛋白原(Citrullinated Fibrinogen,cfb)刺激健康人中性粒细胞，观察NETs形成情况；通过进一步利用基质金属蛋白酶9(MMP9)抑制剂干预实验和Western blot检测PKC/PAD4蛋白表达，探讨潜在分子机制。

RA患者血清SEMA4D水平与血沉(ESR)呈正相关，但未达到统计学显著性(P>0.05)。RA患者血清和滑液中游离型SEMA4D的蛋白水平分别显著高于健康对照组和OA患者（P<0.05），而RA患者外周血中性粒细胞表面膜结合型SEMA4D的蛋白水平显著低于健康对照组（P<0.05）。RA患者体内NETs标志物游离核小体和NE水平分别显著高于健康对照组及OA对照组（P<0.05）。体外实验证实cfb可有效诱导NETs形成（P<0.05），该过程伴随SEMA4D的酶切脱落。MMP9抑制剂可逆转SEMA4D酶切和NETs形成，并抑制cfb诱导的PKC/PAD4蛋白表达上调。

RA患者体内存在NETs过度形成和SEMA4D的异常酶切脱落。SEMA4D酶切激活PKC/PAD4信号通路，促进NETs形成，这一机制可能参与RA的发病过程。